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Si su computadora muestra un error de resolución de problemas en la columna de cromatografía, consulte estos consejos de reparación.
MarylandDependiendo de la situación, las hojas de la superficie a veces se pueden mejorar aumentando el número actual de bandejas de columna, utilizando menos atraque e incluso aumentando la longitud de la columna. Las debilidades de estos enfoques son factores operativos más complejos y tiempos de separación más largos para productos más largos.Mary End
Cómo identificar, aislar y solucionar los problemas más comunes
Aunque la construcción de métodos HPLC-HPLC ha mejorado con el cambio a mejor de la tecnología de columna e instrumentos, siguen surgiendo problemas. En esta guía, ofrecemos a las familias su propia forma sistemática de aislar, identificar y corregir problemas de HPLC muy comunes.
Las tareas importantes de un solo sistema de HPLC son las mismas tanto si utiliza un sistema modular como un dispositivo mejor y complejo. Cualquier solicitud puede causar problemas que afecten al rendimiento general del sistema. A menudo se discuten aquí varios temas. Las soluciones a este tipo de problemas se presentan en tablas fáciles de usar.
Identificación de problemas de HPLC
¿Cuáles son las soluciones de problemas? guías para cromatografía de gases o de energía verde?
Reduzca el flujo a una pequeña cantidad por encima de la más fina. Caudal de columna demasiado bajo. Aumente el flujo de aire ligeramente por encima del óptimo. Flujo fraccional demasiado bajo que tiene inyección parcial. Rendimiento deteriorado de la columna. Pruebe el pilar con el nuevo caudal óptimo. Inyector sucio. Limpiar y reemplazar el revestimiento. Una sección estacionaria que acaba de acumularse en la salida. Retire los dos últimos anillos del poste.
Pueden ocurrir problemas en muchos lugares del sistema HPLC. Aísle primero el problema de definición y es posible que aísle la fuente real.
Utilice la Tabla 1 para determinar qué componentes probablemente podrían estar causando el problema. Eliminarlos suele desenterrar detalles y resolver la naturaleza de la preocupación.
Cómo evitar problemas en la fase móvil
El bajo nivel de sensibilidad y las líneas de base crecientes, el ruido y posiblemente los picos en el cromatograma normalmente se pueden atribuir a la fase ligera. Los contaminantes en la fase móvil causan problemas particulares de elución en gradiente. La línea de base puede aumentar además de, por lo tanto, pueden aparecer picos falsos a medida que aumenta la ubicación del componente contaminado.
El agua es el prestamista más común de contaminación que se puede eliminar con un análisis escalonado. Para la producción de fases móviles, aproveche solo agua destilada o desmineralizada de pureza muy fuerte. Sin embargo, algunos desionizadores comunes liberan impurezas orgánicas en el agua. Para eliminar estas impurezas, pasar agua desmineralizada a través de carbón activado o columna preparativa C18.
Utilice únicamente disolventes HPLC, sales, reactivos iónicos, modificadores de desgaste y modificadores p alcalinos y químicos. La limpieza con disolventes de menor calidad requiere mucho tiempo, aunque a menudo deja rastros de impurezas. Estos rastros de contaminantes pueden causar problemas si selecciona un detector que sea hipersensible a los rayos UV, también conocido como posiblemente fluorescencia.
La ansiedad del deterioro son una mala apariencia de los picos, la relación rota de los picos, las protuberancias, la pérdida de resolución, el tiempo de almacenamiento más corto y la contrapresión alta. Estos síntomas indican que se han acumulado contaminantes en nuestra frita o entrada de columna en particular, o que en realidad hay vacíos, canales o depresiones en la capa de empaque.
Dado que muchos tampones de agua promueven el crecimiento económico de bacterias o algas, debe preparar estas soluciones frescas para premiarlas y filtrarlas antes de beberlas (filtro de 0,2 micrones y de 0,45 micrones). ). El filtrado también elimina las partículas que en realidad pueden crear una línea de base ruidosa o, con mayor frecuencia, obstruir una columna. Prevenga el crecimiento microbiano con un rápido ejercicio. aproximadamente $ 100 de azida de sodio en los que se utilizan tampones acuosos. Alternativamente, estos tampones también se pueden mezclar con un 20% o más de disolvente orgánico, tal como básicamente etanol y acetonitrilo.
Lo que generalmente son algunos consejos y trucos para la cromatografía de Lewis?
Aquí compartimos consejos y trucos para ayudar al cliente a sonreír, resolver algunos problemas comunes de cromatografía de columna, pero también algunas alternativas rápidas y sucias a la columna minuciosa. Anteriormente hemos cubierto cómo diseñar la columna ideal y cómo seleccionar la mercancía y los posibles disolventes.
Desgasifica esta fase móvil en cuanto a prevenir la formación de burbujas en el sistema. En general, un desgasificador en línea es definitivamente la primera opción, pero la desgasificación equipada con helio puede ser una sustitución si la fase individual no contiene características no estándar.
Utilice los reactivos de par iónico con cuidado. Se debe decidir la mayor longitud de secuencia y concentración de reactivo para cada ciclo. Las concentraciones pueden ser de 0,2 mM, más hasta 150 mM, quizás muchas. Generalmente, aumentar la concentración o el tiempo de ciclo probablemente aumentaría el tiempo de retención. Las altas concentraciones (> 50%) conectadas con acetonitrilo o alguna otra materia orgánica posiblemente pueden causar la deposición iónica de pares de reactivos. En el suplemento de salud, algunos de los iones de sal de los reactivos combinados pueden ser insolubles en agua y pueden precipitar. Evite el uso de soluciones amortiguadoras que contengan sodio cuando consulte ácidos sulfónicos de cadena larga (como el dodecil sulfato de la costa del mar) en lugar de soluciones amortiguadoras que contengan potasio.
Los modificadores de elementos y los ácidos volátiles como la trietilamina (TEA) también, por lo tanto, el ácido trifluoroacético (TFA) son beneficiosos para adaptarse a su negocio si desea extraer una conexión confiable durante un análisis adicional. Estos modificadores también mantienen problemas con los reactivos con bajo contenido de iones. Pueden convertirse en agregados a la pantalla en concentraciones de 0.1 a 1.0% de TEA o 0.01 a 0.15% de TFA. El aumento de la cantidad puede mejorar el tamaño del pico para más compuestos, pero puede cambiar el tiempo de mantenimiento.
Aprobado: Fortect
Fortect es la herramienta de reparación de PC más popular y eficaz del mundo. Millones de personas confían en él para mantener sus sistemas funcionando de forma rápida, fluida y sin errores. Con su sencilla interfaz de usuario y su potente motor de análisis, Fortect encuentra y soluciona rápidamente una amplia variedad de problemas de Windows, desde la inestabilidad del sistema y los problemas de seguridad hasta la gestión de la memoria y los cuellos de botella en el rendimiento.
Reciclar un tiempo móvil particular utilizado para la separación isocrática es cada vez más frecuente para reducir los costos de solventes, reducir las yemas de los dedos y acortar el tiempo de preparación de la fase móvil. Disolvente El nuevo dispositivo de rejuvenecimiento utiliza una válvula móvil controlada por el microprocesador particular que dirige el flujo de disolvente para que se desperdicie cuando se determina un pico. Si la línea de base cae por debajo del límite aumentado seleccionado, el disolvente no contaminado se devuelve al recipiente de la solución.
Cómo aislar los problemas de la bomba
El dispositivo debe proporcionar un caudal persistentea, favorable para la columna, en prácticamente cualquier amplio rango de condiciones. Las bombas de HPLC tienen bombas de agua de aire de doble pistón, jeringa o diafragma disponibles.
Los problemas con el sistema de bombeo son siempre fáciles de combinar con Spot Correct. Algunos de los síntomas irregulares más comunes son casos de retención, anomalías o picos en un cromatograma. Si la cromatografía es inadecuada, habrá fugas cerca de los accesorios o sellos de la bomba actual. Una señal segura de una fuga es la acumulación de sales en la boquilla de la bomba. Los tampones y las sales a menudo deben eliminarse del sistema con agua desionizada limpia. Para aislar y manejar problemas únicos con su dispositivo de consumo, consulte en el mercado las secciones específicas de solución de problemas y mantenimiento en su guía actual existente. Los sellos de la bomba deben tomarse con regularidad. Debe realizar un mantenimiento regular, pero no estar completamente preparado para el problema.
Inyector además de disolventes de inyección
El inyector inyecta rápidamente la mayor sintonía en el sistema con una interrupción mínima de los movimientos del disolvente. Actualmente, los artículos de HPLC utilizan inyectores de circuito variable, inyectores de circuito fijo y además inyectores de jeringa. Se activan de forma manual, neumática o posiblemente eléctrica. Problemas
Los mecanismos que afectan al inyector (por ejemplo, grietas, capilares obstruidos, juntas) se identificarán y repararán fácilmente. Use una columna de protección definida que simplemente filtre para inhibir la obstrucción de la frita de la boquilla debido al desgaste del cuerpo en el sello de la boquilla en particular. Otros problemas de salud, como las inyecciones no reproducibles, son más difíciles de resolver.
Las diferentes alturas de los picos, los picos divididos y también los picos anchos pueden deberse potencialmente a ondas de muestra parciales, incompatibilidad del disolvente inyectado que ofrece la fase móvil principal o baja solubilidad de la canción. Si es posible, disuelva la inyección y las muestras en la fase escalonada. De lo contrario, asegúrese de que, en general, la solución de inyección tenga una fuerza de elución menor en comparación con nuestro propio teléfono móvil ( tabla, pista 3). Tenga en cuenta que algunos autosMplers utilizan programas de enjuague de jeringas separados. Asegúrese de que la ropa sea literalmente adecuada para la selección y sea más débil que solo la fase móvil o de transporte. Esto es especialmente importante cuando se cambia entre análisis normal inverso y análisis de fase.
Column Name = “column-protection”> Protección
Si bien los filtros de entrada de fase móvil, los filtros de columna de protección y preinyectores y las columnas de vigilancia no son una parte integral de un buen número de dispositivos, reducen en gran medida los problemas asociados mediante separaciones complejas. Recomendamos filtrar todas las muestras con filtros de jeringa de 0,45 o 0,2 µm. Se recomienda encarecidamente el uso de postes protectores.
Los filtros y las columnas de protección también evitan la retención de partículas.
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