Si votre ordinateur affiche une erreur de dépannage de la lueur de chromatographie, consultez ces conseils de réparation.
MarylandSelon la situation, les sorties en surface peuvent parfois se trouver améliorées en augmentant le nombre actuel de plateaux de commande, en utilisant moins d’amarrage ou en augmentant la longue distance de la colonne. Les inconvénients de ces consultations sont des problèmes opérationnels plus complexes et des temps de fractionnement plus longs pour des produits plus longs.Marie Fin
Comment identifier, isoler et résoudre les problèmes les plus courants
Bien que le développement des formes HPLC-HPLC se soit amélioré avec l’avancement de la technologie des colonnes et, par conséquent, de la technologie des instruments, des problèmes continuent de se poser. Dans le guide, nous proposons aux familles un moyen systématique d’isoler, d’identifier et de corriger de nombreuses complications HPLC courantes.
Les tâches importantes d’un système HPLC étaient les mêmes, que vous utilisiez un PC modulaire en plus d’un appareil plus complexe. Toute demande peut causer des problèmes qui affectent les performances finales du système. Plusieurs questions sont souvent abordées ici. Des solutions à ces problèmes sont proposées dans des tableaux conviviaux.
Identification des problèmes HPLC
Qu’est-ce que c’est haut la main les guides de dépannage pour la chromatographie en phase gazeuse ?
Réduisez le débit comme moyen d’une petite quantité au-dessus de l’optimum. Activité du débit de la colonne trop faible. Augmenter le débit légèrement au-dessus du meilleur possible. Débit fractionné trop faible avec injection partielle. Performance de la colonne détériorée. Testez la colonne au débit optimal incroyable. Injecteur sale. Nettoyez et remplacez la doublure. Une phase stationnaire qui s’est véritablement accumulée dans le débouché. Retirez les quatre derniers anneaux du poteau.
Des problèmes peuvent survenir à de nombreux endroits du système HPLC. Isolez d’abord mon problème de définition, puis isolez la source de bonne foi.
Utilisez la table individuelle pour déterminer quels composants peuvent être à l’origine d’un problème. Les éliminer révèle généralement des détails et couvre la nature du problème.
Comment éviter les problèmes pendant la phase mobile
Une faible sensibilité et des lignes de base se multipliant, du bruit, éventuellement des pics dans le chromatogramme peuvent être attribués maintes et maintes fois à la phase mobile. Les contaminants sur la phase mobile causent des problèmes particuliers d’élution de gradient. La ligne de base peut augmenter et donc de fausses montagnes peuvent apparaître à mesure que le niveau de la composante polluée augmente.
L’eau est la source de pollution la plus courante et peut être éliminée par analyse de phase. Pour la production spécifique de phases mobiles, n’utiliser que de l’eau distillée sinon déminéralisée de très bonne pureté. Cependant, un certain nombre de déioniseurs courants libèrent des polluants organiques dans la mer. Pour éliminer ces impuretés, faites couler de l’eau déminéralisée dans du charbon invité ou dans la colonne préparative C18.
Utilisez uniquement des solvants HPLC, des sels, des réactifs ioniques, des modificateurs d’ajout et des modificateurs alcalins et acides. Le nettoyage avec des solvants de qualité moins coûteux prend du temps mais laisse souvent des accumulations d’impuretés. Ces traces de contaminants peuvent causer des problèmes si vous utilisez un détecteur hypersensible aux UV ou probablement à la fluorescence.
Les symptômes de déclin sont une apparence de pic médiocre, une séparation des pics, des saillies, une perte de résolution, un temps de rétention raccourci et la contre-pression la plus élevée. Ces symptômes indiquent que des contaminants se sont accumulés sur notre propre fritte ou inlt de colonne, ou qu’il y a des vides, des canaux ou des creux dans la couche de garnissage.
Étant donné que de nombreux tampons lacustres favorisent la croissance bactérienne ou algale, vous devez assembler ces solutions fraîches pour le dîner et filtrer le tout avant de boire (filtre 0,2 micron ou 0,45 micron). Le filtrage supprime également les particules qui peuvent réellement créer une ligne de base bruyante ou généralement obstruer une lueur. Empêcher la croissance microbienne en ajoutant environ $ un seul d’azoture de sodium aux tampons aqueux. Alternativement, ces excellents tampons peuvent également être mélangés avec 20% d’autre part de solvant organique tel que l’éthanol et en plus l’acétonitrile.
Quelles sont les créations idées et astuces pour la chromatographie sur colonne ?
Nous partageons ici de bons conseils et astuces pour vous aider à sourire, à résoudre des problèmes de chromatographie sur colonne courants et spécifiques, ainsi que des alternatives rapides et sales à la colonne complète. Nous avons déjà expliqué comment emballer le rayon idéal et comment sélectionner les appareils et les solvants possibles.
Dégazer cette phase mobile pour éviter la formation de bulles dans le système. En général, un seul dégazeur en ligne est certainement le premier choix, mais le dégazage équipé d’hélium peut plutôt être une alternative si la phase individuelle ne contient aucun composant non standard.
Utilisez les réactifs à paires d’ions avec précaution. La longueur de séquence optimale et la concentration de réactif doivent être déterminées pour chaque intervalle. Les concentrations peuvent aller de 0,2 mM, puis jusqu’à 150 mM, plusieurs ou. Généralement, augmenter je dirais la concentration ou le temps de cycle augmentera le temps de stockage. Des concentrations élevées (> 50 %) d’acétonitrile ou d’autres matières organiques peuvent provoquer un dépôt ionique de paires de réactifs. De plus, certains des ions sels actuels des réactifs appariés peuvent être continuellement insolubles dans l’eau et précipiteront. Évitez l’application de tampons contenant du sodium lors de la visite d’acide sulfonique à longue chaîne (comme le sel de mer dodécyl sulfate) au lieu de tampons contenant du potassium.
Les modificateurs d’éléments et les acides instables tels que la triéthylamine (TEA) et donc l’acide trifluoroacétique (TFA) sont bénéfiques pour votre entreprise si vous souhaitez extraire une connexion lors d’une analyse supplémentaire. Ces modificateurs évitent également les problèmes avec les réactifs ioniques à prix réduit. Ils peuvent être ajoutés à ce tamis à des concentrations de 0,1 à 1,0 % de TEA ou de 0,01 à 0,15 % de TFA. L’augmentation des niveaux peut améliorer la forme du pic pour plus d’augmentations, mais peut modifier le temps de rétention.
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2. Lancez le programme et cliquez sur "Scan"
3. Cliquez sur "Réparer" pour résoudre les problèmes détectés
Le recyclage d’une phase mobile particulière utilisée pour la séparation isocratique devient de plus en plus populaire pour réduire les coûts des agents de nettoyage synthétiques, réduire le bout des doigts et raccourcir le temps de préparation des aliments en phase mobile. Solvant Le nouveau dispositif de régénération utilise une bonne vanne mobile solide contrôlée par un microprocesseur qui vend le débit de solvant afin qu’il manque lorsqu’un pic est détecté. Si le régulier tombe en dessous de la limite haute sélectionnée, le favorable non contaminé est renvoyé dans le conteneur de solvant.
Isolation des problèmes de pompe
L’appareil doit fournir un débit constanta, constructif pour la colonne, dans une large plage de conditions. Les pompes HPLC ont des pompes à air à simple ou double aide, à seringue ou à membrane.
Les problèmes du système de pompage sont généralement faciles à résoudre avec Spot Correct. Certains des symptômes irréguliers les plus courants sont les temps de rétention, les anomalies ou les pics dans un chromatogramme. Si la chromatographie est inadéquate, il y aura généralement des fuites près des raccords de la pompe ni des joints. Un signe certain d’une fuite sera probablement l’accumulation de sels sur la buse de brumisation de la pompe. Les tampons et les sels doivent souvent être purgés du système quotidiennement avec de l’eau déminéralisée. Pour isoler et résoudre des problèmes uniques avec votre appareil grand public, reportez-vous aux sections spécifiques de dépannage et de maintenance de votre guide existant. Les joints de la pompe doivent être remplacés régulièrement. Vous avez besoin de faire un entretien régulier, pas d’être complètement préparé pour le problème.
Injecteur en plus des solvants d’injection
L’injecteur injecte rapidement le plus gros échantillon dans la machine avec une perturbation minimale de l’écoulement du solvant. Actuellement, les articles HPLC utilisent des injecteurs à boucle variable, des injecteurs à boucle fixe et beaucoup plus d’injecteurs à seringue. Ils sont actionnés manuellement, pneumatiquement voire éventuellement électriquement. Problèmes
Les mécanismes affectant votre injecteur (par exemple fissures, capillaires obstrués, joints) peuvent être purement identifiés et réparés. Utilisez une colonne de garde que la majorité d’entre vous filtre simplement pour éviter le colmatage de cette fritte de buse en raison de l’usure physique d’un joint de buse particulier. D’autres problèmes, comme les injections bien que non reproductibles, sont plus difficiles à résoudre.
Des hauteurs de pic différentes, des pics divisés et des pics larges pourraient certainement être causés par des ondes d’échantillon incomplètes, une incompatibilité liée au solvant injecté avec la phase mobile principale ou une mauvaise solubilité de l’échantillon. Dissoudre la procédure et les échantillons dans la phase de transfert si future. Sinon, assurez-vous que la solution d’injection comprend une force d’élution inférieure à celle de notre propre téléphone portable (tableau , phase 3). Veuillez noter que certains automates utilisent des applications logicielles de rinçage de seringue distinctes. Assurez-vous que le linge est adapté à cette sélection et est plus faible que la phase de transport mobile. Ceci est particulièrement important lors de la torsion entre l’analyse normale inversée et l’analyse de phase.
Bien que les filtres d’entrée de phase mobiles, les filtres préinjecteurs et donc les filtres de pré-colonne, et les pré-colonnes ne fassent pas nécessairement partie intégrante de la plupart des appareils, ils réduisent considérablement les problèmes liés aux séparations complexes. Nous recommandons de filtrer tous les échantillons avec des filtres seringues de 0,45 ou 0,2 µm. L’utilisation d’articles de protection ou d’articles de blog est fortement recommandée.
Les filtres et le contenu de protection empêchent également la rétention des particules.
