Zatwierdzono: Fortect
Jeśli system wyświetla błąd rozwiązywania problemów z kolumną chromatograficzną, zapoznaj się z tego rodzaju wskazówkami dotyczącymi naprawy.
MarylandW zależności od sytuacji wyjścia z pokładu można czasem poprawić, zwiększając określoną bieżącą liczbę tac kolumnowych, stosując skrócone dokowanie lub zwiększając długość kolumny. Wadami tych podejść są bardziej złożone problemy biznesowe i dłuższe czasy rozdzielania dla znacznie większej liczby produktów.Mary End
Jak identyfikować, izolować i rozwiązywać najczęstsze problemy
Chociaż każdy rozwój metod HPLC-HPLC uległ poprawie wraz z postępem technologii kolumn i aparatury, problemy muszą się pojawić. W tym przewodniku oferujemy turystom systematyczny sposób wyodrębniania, identyfikowania i doskonalenia wielu typowych problemów HPLC.
Ważne zadania w systemie HPLC są takie same, niezależnie od tego, czy wszyscy używają systemu modułowego, czy też faktycznie bardziej złożonego urządzenia. Każde żądanie może powodować czynniki, które wpływają na ogólną wydajność maszyny. Często omawia się tu kilka kwestii. Rozwiązania tych problemów przedstawione są w przyjaznych dla użytkownika tabelach.
Identyfikowanie problemów HPLC
Jakie są rozwiązywanie problemów przewodniki przeznaczone do chromatografii gazowej?
Zmniejsz przepływ do niewielkiej ilości w optymalnym zakresie. Zbyt niskie natężenie przepływu w kolumnie. Zwiększyć zazwyczaj przepływ nieco powyżej optymalnego. Przepływ ułamkowy zbyt zmniejszony przy częściowym wtrysku. Pogorszona wydajność kolumny. Przetestuj nową kolumnę przy nowym optymalnym natężeniu przepływu. Brudny wtryskiwacz. Wyczyść i wymień wkładkę. Faza broszur, która właśnie nagromadziła się w mediach. Usuń ostatnie dwa pierścienie z właściwego posta.
Problemy mogą wystąpić w wielu miejscach głównego systemu HPLC. Najpierw wyizoluj problem z definicją, a następnie wyizoluj rzeczywiste źródło.
Użyj tabeli 1, aby określić, które aspekty mogą być przyczyną problemu. Wyeliminowanie ich przez większość czasu ujawnia szczegóły i rozwiązuje naturę tego konkretnego problemu.
Jak uniknąć problemów w fazie mobilnej
Niska czułość i rosnące linie bazowe, szum, prawdopodobnie piki chromatogramu można często przypisać fazie ruchomej. Zanieczyszczenia w fazie ruchomej powodują szczególne problemy z elucją gradientową. Linia bazowa może się wzmocnić i dlatego mogą pojawić się fałszywe piki, ponieważ zwykle wzrasta poziom zanieczyszczonego składnika.
Woda jest najczęściej używanym źródłem zanieczyszczeń, które można wyeliminować dzięki analizie faz. Do produkcji podestów mobilnych należy używać wyłącznie wody destylowanej lub demineralizowanej o bardzo dobrej czystości. Jednak niektóre popularne dejonizatory uwalniają do wody zanieczyszczenia wytworzone organicznie. Aby usunąć te zanieczyszczenia, przeprowadź wodę demineralizowaną przez węgiel aktywny lub preparat C18.
Używaj wyłącznie rozpuszczalników HPLC, soli, odczynników jonowych, modyfikatorów zużycia oraz modyfikatorów zasadowych i kwasowych. Czyszczenie rozpuszczalnikami o niższej jakości będzie czasochłonne, ale często pozostawia ślady zanieczyszczeń. Te drobnoustroje zanieczyszczeń mogą powodować problemy, jeśli używasz detektora, który jest nadwrażliwy na promieniowanie UV, a być może nawet na fluorescencję.
Objawy pogorszenia to słaba obecność pików, oddzielenie pików, guzki, utrata rozdzielczości, skrócony czas retencji i wysokie ciśnienie wsteczne. Wskaźniki te wskazują, że zanieczyszczenia nagromadziły się na samym wlocie fryty lub kolumny lub że w odbieranej warstwie znajdują się puste przestrzenie, kanały lub zagłębienia.
Ponieważ wiele buforów wodnych sprzyja rozwojowi bakterii i może to być rozwój glonów, powinieneś przygotować te świeże roztwory przed obiadem i przefiltrować je przed wypiciem (filtr 0,2 mikrona, być może 0,45 mikrona ). Filtrowanie usuwa również zanieczyszczenia, które mogą faktycznie tworzyć hałaśliwą linię bazową, prawdopodobnie zwykle zatykają kolumnę. Zapobiegaj rozwojowi drobnoustrojów, dodając około 100 USD azydku sodu, aby wspomóc bufory wodne. Alternatywnie, bufory te można również automatycznie mieszać z 20% lub więcej rozpuszczalników organicznych, takich jak etanol i acetonitryl.
Jakie są wskazówki i triki do chromatografii strumieniowej?
Tutaj dzielimy się wskazówkami i trikami, które pozwolą Ci się uśmiechnąć, rozwiązać niektóre typowe problemy związane z chromatografią kolumnową oraz kilka szybkich i brudnych alternatyw dla tej pełnej kolumny. Wcześniej omówiliśmy, jak ostatecznie zapakować idealną kolumnę i jak decydować o urządzeniach i możliwych rozpuszczalnikach.
Odgazuj tę sekcję mobilną, aby zapobiec tworzeniu się bąbelków podczas instalacji. Generalnie odgazowywacz in-line jest zdecydowanie typem pierwszego wyboru, ale odgazowywanie wyposażone w hel może być ich alternatywą, jeśli poszczególna faza zawiera zdecydowanie niestandardowe komponenty.
Używaj ostrożnie odczynników par jonowych. W każdym cyklu należy określić optymalną długość sekwencji i stężenie odczynnika. Stężenia mogą wynosić do 0,2 mM, plus do 150 mM, wiele osób lub. Ogólnie zwiększenie stężenia lub punktu cyklu w czasie zwiększy czas retencji. Duże ilości (> 50%) acetonitrylu lub innych substancji organicznych mogą powodować osadzanie jonów par odczynników. Ponadto niektóre jony soli sparowanych odczynników mogą być nierozpuszczalne w wodzie iw rezultacie wytrącać się. Unikaj używania buforów zawierających sód podczas odwiedzania długołańcuchowych kwasów sulfonowych (takich jak siarczan dodecylu oceanu morskiego) zamiast buforów zawierających potas.
Modyfikatory pierwiastków i lotne kwasy, takie po prostu dlatego, że trietyloamina (TEA), a zatem kwas trifluorooctowy (TFA) są korzystne dla Twojej działalności, jeśli chcesz stworzyć połączenie podczas dalszej analizy. Te modyfikatory pozwolą uniknąć problemów z odczynnikami o niskiej zawartości jonów. Z pewnością powinny być dodawane do ekranu w stężeniach wraz z 0,1 do 1,0% TEA lub 0,01 wracając do 0,15% TFA. Zwiększenie ilości może poprawić bardzo ruchliwy kształt dla większej liczby związków, ale może zmienić ten czas retencji.
Zatwierdzono: Fortect
Fortect to najpopularniejsze i najskuteczniejsze narzędzie do naprawy komputerów na świecie. Miliony ludzi ufają, że ich systemy działają szybko, płynnie i bez błędów. Dzięki prostemu interfejsowi użytkownika i potężnemu silnikowi skanowania, Fortect szybko znajduje i naprawia szeroki zakres problemów z systemem Windows - od niestabilności systemu i problemów z bezpieczeństwem po zarządzanie pamięcią i wąskie gardła wydajności.
Recykling określonej fazy telefonicznej wykorzystywanej do separacji izokratycznej staje się coraz bardziej popularny w celu zmniejszenia kosztów rozpuszczalników, zmniejszenia liczby opuszków palców, a co za tym idzie skrócenia czasu przygotowania fazy ruchomej. Rozpuszczalnik Całkowicie nowe urządzenie do regeneracji wykorzystuje ruchomy zawór sterowany przez mikroprocesor, który kieruje przepływem rozpuszczalnika, dzięki czemu jest on marnowany po wykryciu piku. Jeśli linia bazowa spadnie poniżej zidentyfikowanego górnego limitu, niezanieczyszczony rozpuszczalnik jest zwracany do większości pojemnika z rozpuszczalnikiem.
Izolowanie problemów z pompą
Urządzenie musi zapewniać stałe natężenie przepływu, korzystne dla kolumny, w szerokim zakresie warunków. Pompy HPLC są wyposażone w jedno- lub dwutłokowe, strzykawkowe lub membranowe pompy wentylacyjne.
Problemy z systemem pompowania zwykle łatwo jest połączyć z Spot Correct. Niektóre z najczęstszych nieregularnych objawów to czas przechowywania, nieprawidłowości lub piki na chromatogramie. Jeśli chromatografia jest niewystarczająca, wystąpią nieszczelności w złączkach lub uszczelkach pompy. Pewnym przejawem nieszczelności jest nagromadzenie soli na dyszy pompy. Bufory i sole często trzeba codziennie wypłukiwać ze społeczności czystą dejonizowaną wodą. Aby wyodrębnić i dodatkowo rozwiązać unikalne problemy z urządzeniem konsumenckim, zapoznaj się z określonymi sekcjami rozwiązywania problemów i konserwacji w ramach istniejącego przewodnika. Niemniej jednak uszczelki pompy powinny być regularnie wymieniane. Musisz robić regularne problemy, nie być całkowicie przygotowanym na problem.
Wtryskiwacz oprócz rozpuszczalników do wstrzykiwań
Wtryskiwacz szybko wstrzykuje najdrobniejszą próbkę do systemu przy minimalnym zakłóceniu przepływu rozpuszczalnikiem. Obecnie w artykułach HPLC stosuje się wtryskiwacze o zmiennej pętli, wtryskiwacze o stałej pętli, a ponadto wtryskiwacze strzykawkowe. Zazwyczaj aktywowane są ręcznie, pneumatycznie lub ewentualnie elektrycznie. Problemy
Mechanizmy wpływające na wtryskiwacz (np. pęknięcia, zatkane naczynia włosowate, uszczelki) można łatwo zidentyfikować i naprawić. Użyj kolumny ochronnej, którą po prostu filtrujesz, aby zapobiec zatykaniu się fryty dyszy, aby pomóc w fizycznym zużyciu konkretnej uszczelki dyszy. Inne problemy, takie jak niemożliwe do odtworzenia wstrzyknięcia, są trudniejsze do rozwiązania.
Różne wysokości pików, rozszczepione wysokie i szerokie piki mogą być potencjalnie spowodowane tylko niepełnymi falami próbki, niezgodnością wstrzykiwanego syntetycznego środka czyszczącego z główną fazą ruchomą lub słabą rozpuszczalnością podzbiorów. Jeśli to możliwe, rozpuść nastrzyk i próbki w tej fazie przenoszenia. W przeciwnym razie upewnij się, że roztwór do wstrzykiwań ma mniejszy efekt elucji niż nasz telefon komórkowy (tabela rodzin , faza 3). Należy pamiętać, że niektóre autosMPlery obsługują oddzielne programy płukania strzykawek. Upewnij się, że pranie jest odpowiednie dla wyboru i jest lepsze niż faza noszenia lub przenoszenia. Jest to prawie na pewno szczególnie ważne przy przełączaniu między odwrotną analizą normalną a analizą fazową.
Nazwa kolumny = “column-protection”> Ochrona
Chociaż mobilne filtry wlotowe okresowe, filtry wstępnego wtrysku i kolumny ochronnej, dodatkowo kolumny ochronne nie są integralną częścią większości urządzeń, znacznie redukują problemy związane ze złożonymi separacjami. Zalecamy filtrowanie całej próbki za pomocą filtrów strzykawkowych 0,45 lub 0,2 µm. Zaleca się stosowanie słupków ochronnych.
Filtry i kolumny ochronne zapobiegają również zatrzymywaniu cząstek powietrza.
Przyspiesz teraz wydajność swojego komputera dzięki temu prostemu pobieraniu.
