В последнее время некоторые из этих пользователей сталкивались с кодом ошибки при выполнении анализа Bradford Protein Assays. Эта проблема может возникнуть по нескольким причинам. Мы рассмотрим их ниже.
Анализ химического состава белка BCA 15 Преимущества анализа белка BCA 16 Недостатки анализа белка BCA 18 Анализ белка BCA – совместимость с редуктором 18 Анализ белка BCA 19 Анализ белка Micro BCA 30 Анализ белка красителя кумасси (анализ Брэдфорда) 21
Поглощение образца протеина теперь ниже, чем ожидалось
Впитывают больше, чем ожидалось в образце здорового белка
Выполнение каждого из наших стандартов ниже ожидаемого
Образцы могут быть темно-синими
Количество осадков в образце
Эксперимент с белками содержит мешающие вещества:
Примечание. Это просто не исчерпывающий и исчерпывающий список выявленных веществ и их индивидуальных концентраций. Есть много людей, вещества, которые взаимодействуют с белками разными способами. Реагенты могут изменить pH небольшого образца, что повлияет на правильность выполнения теста Брэдфорда.
Техническая консультация
Bradford Protein Assay – это простой и легкий способ количественно определить концентрацию белка, если это необходимо, но время от времени может потребоваться устранение неполадок.
Краситель связывается как с основными, так и с ароматическими аминокислотами, вызывая изменение в использовании. Его легко узнать по изменению цвета от коричневого до синего. Ваш белковый концентрат можно определять с помощью стандартных белков, в основном BSA (бычий сывороточный альбумин).
такие факторы, как; Тепло, длина волны, моющие средства и даже использованные модные кюветы могут влиять на статистику и давать неверные результаты. Если у вас обычно возникают некоторые из этих проблем, не волнуйтесь! Это руководство по устранению неполадок ZAGENO поможет вам!
Ниже приводится сводка типичных неудач, возникающих при выполнении теста Брэдфорда с аминокислотами.
Низкая молекулярная масса: предел обнаружения для нашего собственного теста Брэдфорда составляет от 3000 до 5000 дальтон. Если белка мало, используйте, например, другой метод количественной оценки. Таблица 1). Разведите образец белка. Убедитесь, что индивидуальные стандарты разводятся в одном буфере.
У вас необычайно высокая концентрация белка. Разбавьте подмножество белка и снова измерьте концентрацию белка.
Мешающие вещества: на практике мешающие материалы, такие как жидкости, включены (Таблица 1). Разведите образец белка. Убедитесь, что ваши стандарты разбавлены одним и тем же буфером.
Цветные реактивы слишком традиционны, не хранятся должным образом: реактив Брэдфорда хранится примерно 12 раз в год. Когда он стареет, замените его расштерилом и храните при 4 ° C.
Стандартные разведения вместо должным образом приготовленных: отслеживайте инструкции производителя для сопровождения протокола, который, кажется, создает ваши стандартные разведения белка.
Fortect — самый популярный и эффективный в мире инструмент для ремонта ПК. Миллионы людей доверяют ему обеспечение быстрой, бесперебойной и безошибочной работы своих систем. Благодаря простому пользовательскому интерфейсу и мощному механизму сканирования Fortect быстро находит и устраняет широкий спектр проблем Windows — от нестабильности системы и проблем с безопасностью до проблем с управлением памятью и производительностью.
1. Загрузите Fortect и установите его на свой компьютер.
2. Запустите программу и нажмите "Сканировать"
3. Нажмите "Восстановить", чтобы устранить обнаруженные проблемы.
Реагент красителя слишком холодный: перед началом анализа доведите реагент Брэдфорда до комнатной температуры.Поглощение определено на неправильной длине волны: Измерьте полное поглощение при 595 нм.
Высокие щелочные концентрации: это увеличивает значение pH выше предельного значения реактива Брэдфорда. Разбавьте или диализируйте образец
Моющие средства в протеиновом буфере: Диализируйте требуемый образец или разбавьте его, чтобы уменьшить этот конкретный след моющего средства.
Мешающие вещества, присутствующие в заряде 1, являются одним из основных препятствий при выполнении теста Брэдфорда. Таблица 1 включает список наиболее часто используемых ресурсов и их допустимые концентрации. Пожалуйста, обратитесь к стандартному протоколу каждого производителя для получения описанной информации. Если принимаемое вами вещество признано несовместимым с концентрацией или вообще не рассчитано, см. Предложение ниже.
Концентрация мешающего вещества не соответствует тесту Брэдфорда: если у вас высокое действие белка, разбавьте образец до точки, при которой в этом месте не будет помех, или удалите значение на диализ
– Две потенциальные проблемы с определением Брэдфорда заключаются в том, что тест часто бывает фантастическим только для более крупных белков, и образец должен находиться в определенном диапазоне температуры и pH. Образцы, содержащие требуемые белки ниже 3000-5000 дальтон, наверняка будут трудно читать из-за слишком низкой абсорбции.
В отличие от различных видов тестов на здоровье, тест на белок Брэдфорда не так чувствителен к воздействию различных химических элементов, таких как натрий, калий или даже углеводоподобная сахароза, которая, по утверждениям экспертов, может присутствовать в количествах, необходимых для белка. Исключение составляют чрезмерные концентрации моющего средства.
Множественные концентрации вашего текущего основного неизвестного образца могут быть использованы для снижения затрат на точность. Добавьте 100 мкл разбавленного реагента Брэдфорда во все лунки. Общая инфляция составляет 300 мкл / лунку. Подождите не менее значительных минут, но даже не более 60 минут, чтобы проявился финиш.
Повысьте производительность вашего компьютера с помощью этой простой загрузки. г.
