Godkänd: Fortect
Om din dator visar ett felsökningsfel för kromatografikolumnen, se reparationstipsen.
MarylandBeroende på situationen kan golvbrädornas utgångar ibland förbättras genom att öka det nuvarande antalet kolumnbrickor, använda väldigt mycket dockning eller öka längden på kolonnen. Nackdelarna med dessa tillvägagångssätt är mer komplexa arbetsproblem och längre separationstider för produkter med längre tid.Mary End
Hur man identifierar, isolerar och åtgärdar de vanligaste problemen
Även om typen av utveckling av HPLC-HPLC-metoder har förbättrats med den speciella utvecklingen av kolonn- och instrumentteknik, börjar problem uppstå. I den här guiden erbjuder vi deras familjer ett systematiskt sätt att isolera, identifiera och rätta till många vanliga HPLC-problem.
De viktiga uppgifterna kopplade till ett HPLC-system är desamma oavsett om köpare använder ett modulärt system utöver en ny mer komplex enhet. Varje begäran kan orsaka konflikter som påverkar produktens övergripande prestanda. Flera frågor diskuteras ofta här. Lösningar med dessa problem presenteras i användarvänliga tabeller.
Identifiera HPLC-problem
Vad är felsökningen guider för att passa gaskromatografi?
Minska flödet till en liten mängd som tidigare nämnts optimalt. Kolumnflödet är för lågt. Öka för närvarande flödet något över optimalt. Fraktionellt flöde för ner med partiell injektion. Försämrad kolumns prestanda. Testa vilken kolumn vid den nya optimala flödeshastigheten. Smutsig injektor. Rengör och byt ut fodret. En stationär förrådsfas som precis har samlats i butiken. Ta bort de två sista ringarna från hela stolpen.
Problem kan uppstå på många ställen i själva HPLC-systemet. Isolera definitionsproblemet först och isolera sedan den faktiska källan.
Använd tabell 1 för att avgöra vilka aspekter som kan orsaka problemet. Att eliminera dem avslöjar ofta detaljer och löser problemets natur.
Hur man undviker problem i den mobila fasen
Låg känslighet och växande baslinjer, brus, eventuellt toppar tillbaka kromatogrammet kan ofta hänföras till vilken mobil fas som helst. Föroreningar i den mobila fasen ger speciella gradientelueringsproblem. Baslinjen kan ge en boost till och därför kan falska toppar uppträda när nivån av den kontaminerade komponenten för närvarande ökar.
Vatten är den mest normala föroreningskällan som kan elimineras från fasanalys. För produktion av mobil utveckling, använd endast destillerat eller avmineraliserat vatten med utpräglat god renhet. Vissa vanliga avjonisatorer släpper dock ut organiskt odlade föroreningar i vattnet. För att ta bort dessa föroreningar, skynda avmineraliserat vatten genom aktivt kol eller förberedande krama dig C18.
Använd endast HPLC-lösningsmedel, salt, joniska reagenser, slitagemodifierare och alkaliska och urinsyramodifierare. Rengöring med lösningsmedel av lägre kvalitet är mycket tidskrävande men lämnar ofta spår av föroreningar. Dessa mikrober av föroreningar kan orsaka problem om du kanske använder en detektor som är överkänslig mot UV eller möjligen till och med fluorescens.
Symtomen på försämring är dålig fysisk topp, separation av toppar, stötar, förlust av upplösning, minskad retentionstid och högt mottryck. Dessa biverkningar tyder på att föroreningar har samlats på vår fritta eller kolonninlopp, eller att det utan tvekan finns hålrum, kanaler eller fördjupningar i fyllningsskiktet.
Eftersom många vattenbuffertar främjar bakteriell aka algtillväxt, bör du förbereda dessa färska lösningar för middag och filtrera dem innan du dricker (0,2 mikron och det kan vara 0,45 mikron filter ). Filtrering tar också bort skräp som faktiskt kan skapa en bullrig baslinje och som vanligtvis också täpper till en kolumn. Förhindra mikrobiell tillväxt genom att bara lägga till cirka 100 $ natriumazid för att hjälpa dig till vattenhaltiga buffertar. Alternativt kan dessa buffertar också växa till att blandas med 20 % eller fler organiska lösningsmedel, såsom etanol och acetonitril.
Vilka är några tips och knep för glimkromatografi?
Här delar vi tips och tricks för att förbättra ditt leende, lösa några vanliga kolumnkromatografiska utmaningar och några snabba och smutsiga alternativ till hela spalten. Vi har tidigare täckt hur du kan hjälpa dig att paketera den ideala kolonnen och hur du använder specifika enheter och möjliga lösningsmedel.
Avgasa denna mobila position för att förhindra att det bildas bubblor i utrustningen. I allmänhet är en in-line-avgasare definitivt förstahandsvalet, men heliumutrustad avgasning kan vara ett bra alternativ om den enskilda fasen innehåller n’ icke-standardiserade komponenter.
Använd jonparreagens med försiktighet. Den optimala sekvenslängden och reagenskoncentrationen bör alltid bestämmas för varje cykel. Koncentrationer kan vara med 0,2 mM, plus upp till 150 mM, verkligen eller. I allmänhet kommer att öka koncentrationen eller cykeln en tid att öka retentionstiden. Höga halter (> 50%) av acetonitril eller andra organiska ämnen kan orsaka jonavlagring av reagenspar. Dessutom kan några av saltjonerna i dessa parade reagens vara olösliga i vatten och kommer sedan att fällas ut. Undvik att använda buffertar som innehåller natrium när du besöker långkedjiga sulfonsyror (som havsnatriumdodecylsulfat) istället för buffertar som innehåller kalium.
Elementmodifierare och flyktiga syror som trietylamin (TEA) och därför trifluorättiksyra (TFA) är praktiska för din verksamhet om du vill skapa en koppling under vidare analys. Dessa modifieringsmedel undviker likaså problem med lågjonreagenser. De kommer ofta att läggas till skärmen i koncentrationer av 0,1 till 1,0 % TEA eller 0,01 till positivt 0,15 % TFA. Att öka mängden kan förbättra den högsta punktformen för fler föreningar, men kan utan tvekan förändra retentionstiden.
Godkänd: Fortect
Fortect är världens mest populära och effektiva PC-reparationsverktyg. Det litar på miljontals människor för att hålla sina system igång snabbt, smidigt och felfritt. Med sitt enkla användargränssnitt och kraftfulla skanningsmotor hittar och fixar Fortect snabbt ett brett utbud av Windows-problem – från systeminstabilitet och säkerhetsproblem till minneshantering och prestandaflaskhalsar.
Återvinning av en viss fas som används för isokratisk separation har blivit mycket populärt för att minska kostnaderna för lösningsmedel, minska fingertopparna och till och med förkorta beredningstiden för mobil fas. Lösningsmedel Den bättre regenereringsanordningen använder en mobil ventil som styrs av – en mikroprocessor som styr lösningsmedelsflödet så att det går till spillo när en topp anses detekterad. Om baslinjen faller under den beslutade höga gränsen, återförs oförorenat lösningsmedel till hela lösningsmedelsbehållaren.
Isolering av pumpproblem
Anordningen måste ge en viss konstant flödeshastigheta, gynnsam för kolonnen, närvarande under ett brett spektrum av förhållanden. HPLC-pumpar slutar med en eller dubbel kolv, spruta eller membran som andas syrgaspumpar.
Problem med pumpsystemet är vanligtvis lätta att kombinera med Spot Correct. Några av de vanligaste oregelbundna symtomen är konserveringstider, abnormiteter eller toppar i ett kromatogram. Om kromatografin är otillräcklig, kommer det att finnas läckor i praktiskt taget pumpens kopplingar eller tätningar. En säker sammanfogning av en läcka är ansamling av salt på pumpmunstycket. Buffertar och salter behöver i många fall spolas ur nätverket dagligen med rent avjoniserat vatten. För att isolera och lösa unika problem med din konsumentenhet, annonsera till de specifika felsöknings- och underhållsavsnitten sist din befintliga guide. Pumptätningarna bör bytas ut regelbundet. Du måste göra regelbundna fordonsreparationer, inte vara helt förberedd på problemet.
Injektor utöver injektionslösningsmedel
Injektor injicerar snabbt det bredaste provet i systemet med minimal avbrottstid för flödet psolvent. För närvarande använder HPLC-artiklar injektorer med variabel loop, injektorer med fast loop och dessutom sprutinjektorer. De aktiveras vanligtvis manuellt, pneumatiskt eller eventuellt elektriskt. Problem
Mekanismer som påverkar injektorn (t.ex. sprickor, tilltäppta kapillärkärl, tätningar) kan lätt identifieras och repareras. Använd en skyddskolonn som du helt enkelt filtrerar för att förhindra igensättning av munstycksfrittan på grund av att den kommer att slita fysiskt på den specifika munstyckstätningen. Andra problem, såsom oreproducerbara injektioner, är svårare att lösa.
Olika topphöjder, delade toppar och breda toppar kan potentiellt orsakas av ofullständiga provvågor, inkompatibilitet hos det injicerade syntetiska rengöringsmedlet med den huvudsakliga mobila fasen eller dålig strukturlöslighet. Lös upp injektionen och proverna i själva överföringsfasen om möjligt. Se annars till varför injektionslösningen har en lägre eluering än vår egen mobiltelefon ( utemöbler, fas 3). Observera att vissa autosMplers drar fördel av separata sprutsköljprogram. Se till att tvättmaskinen/torktumlaren är lämplig för valet och är bättre än mobil- eller bärfasen. Detta kan vara särskilt viktigt när man växlar mellan omvänd normala förfrågningar och fasanalys.
Kolumnnamn = “column-protection”> Skydd
Även om mobila tidsinloppsfilter, förinjektor- och skyddskolonnfilter, och därefter skyddskolonner inte är en integrerad del involverade i de flesta enheter, minskar de avsevärt problemen relaterade till komplexa separationer . Vi rekommenderar att allt biologiskt material filtreras med 0,45 eller 0,2 µm sprutfilter. Användning av skyddsstolpar rekommenderas starkt.
Filter och skyddspelare förhindrar även kvarhållande av luftpartiklar.
Snabba upp din dators prestanda nu med denna enkla nedladdning.
